Ultra Nuclease GMP-kwaliteit
Katnummer: HC2016A
UltraNuclease GMP-kwaliteit wordt tot expressie gebracht en gezuiverd in Escherichia coli (E.coli) door genetisch gemanipuleerd en bereid onder de GMP-omgevingen.Het kan de viscositeit van celsupernatant en cellysaat in wetenschappelijk onderzoek verminderen, de efficiëntie van de eiwitzuivering verhogen en het functionele onderzoek naar eiwitten verbeteren.Het product kan ook de nucleïnezuurresiduen van de gastheer reduceren tot pg-kwaliteit, waardoor de prestaties en veiligheid van biologische producten van toepassingen, waaronder viruszuivering, vaccinproductie en farmaceutische productie van eiwitten/polysachariden, worden verbeterd.Daarnaast kan het product ook worden toegepast om het klonteren van menselijke mononucleaire cellen uit perifeer bloed (PBMC) bij celtherapie en vaccinontwikkeling te voorkomen.
UltraNuclease wordt geleverd in de vorm van een gesteriliseerd reagens, geëlueerd in buffer (20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerine), met het uiterlijk van een kleurloze, transparante vloeistof.Dit product wordt geproduceerd volgens GMP-procesvereisten en wordt geleverd in vloeibare vorm.
Componenten
UltraNuclease GMP-kwaliteit (250 U/μL)
Opslag condities
Het product wordt verzonden met droogijs en kan twee jaar worden bewaard bij -25℃~-15°C.
Als het product geopend is en langer dan een week bij 4℃ bewaard is, adviseren wij filterenhet product om microbiële besmetting te voorkomen.
Specificaties
| Expressie gastheer | Recombinante E. coli met UltraNuclease-gen |
| Moleculair gewicht | 26,5 kDa |
| so-elektrisch punt | 6,85 |
| Puurheid | ≥99% (SDS-PAGINA) |
| Opslagbuffer | 20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerine |
|
Eenheidsdefinitie | De definitie van één activiteitseenheid (U) is de hoeveelheid enzym die wordt gebruiktverander de absorptiewaarde van ΔA260 met 1,0 in 30 minuten in een 2,625 mlreactiesysteem bij 37℃ met een pH van 8,0 (equivalent aan volledige vertering van37 μg zalmsperma-DNA in oligonucleotiden). |
Instructies
1. Voorbeeld Verzameling
Hechtende cellen: verwijder het medium, was de cellen met PBS en verwijder het supernatant.
Suspensiecellen: verzamel de cellen door centrifugeren, was de cellen met PBS, centrifugeer bij 6.000rpm gedurende 10 minuten, verzamel de pellet.
Escherichia coli: verzamel de bacteriën door centrifugeren, één keer wassen met PBS, centrifugeren bij 8.000rpm gedurende 5 minuten en verzamel de pellet.
2. Monsterbehandeling
Behandel de verzamelde celpellets met lysisbuffer in de verhouding van massa (g) tot volume (ml) 1:(10-20), of met mechanische of chemische methoden op ijs of bij kamertemperatuur (1 g celpellet bevat ongeveer
109 cellen).
3. Enzymbehandeling
Voeg 1-5 mM MgCl toe aan het reactiesysteem en stel de pH in op 8-9.
Voeg UltraNuclease toe in een verhouding van 250 eenheden om 1 g celpellets te verteren en incubeer bij 37℃ gedurende meer dan 30 minuten.Raadpleeg het formulier 'Aanbevolen reactietijd' om de gewenste reactietijd te kiezenduur van de behandeling.
4. Supernatant Verzameling
Centrifugeer gedurende 30 minuten bij 12.000 rpm en verzamel het supernatant.
Opmerking: Als de oplossing zuur of alkalisch is, of hoge concentraties zout, schoonmaakmiddelen ofdenaturanten, verhoog dan de enzymdosering of verleng de behandeltijd dienovereenkomstig.
Aanbevolen reactieomstandighedenons
| Parameter | Optimale conditie | Effectieve conditie |
| Mg²+Concentratie | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperatuur | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT-concentratie | 0-100 mM | >0 mM |
| Mercaptoethanol-concentratie | 0-100 mM | >0 mM |
| Concentratie van monovalente kationen | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Fosfaat-lon-concentratie | 0-10 mM | 0-100 mM |
Aanbevolen Reactie Tijd (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8,0)
| UltraNuclease-hoeveelheid (eindconcentratie) | Reactietijd |
| 0,25 E/ml | >10 uur |
| 2,5 E/ml | >4u |
| 25 E/ml | 30 minuten |
Opmerkingen:
Draag de nodige PBM's, zoals laboratoriumjas en handschoenen, om uw gezondheid en veiligheid te garanderen!
