Recombinant trypsine
Trypsine splitst specifiek de C-terminale peptidebindingen van lysine en arginine, die intercellulaire bindende eiwitten kunnen afbreken.De aminozuursequentie van het recombinante trypsine geproduceerd door Hyasen Biotech is dezelfde als die van trypsine afgeleid van de varkenspancreas, en wordt geproduceerd door recombinante Escherichia coli-expressie.Het kan de traditionele extractie van trypsine vervangen voor celvertering in vaccins, stamcellen, immuunceltherapie, screening van geneesmiddelen, antilichamen en andere gebieden.Aprotinine, trypsineremmer uit sojabonen, enz. kunnen de trypsineactiviteit duidelijk remmen.
Recombinant trypsine heeft dezelfde eigenschappen als natuurlijk geëxtraheerd trypsine.Dit product wordt vervaardigd in een werkplaats van GMP-kwaliteit.Bij de fermentatie, zuivering en uiteindelijke ingrediënten worden geen grondstoffen van dierlijke oorsprong gebruikt.Tegelijkertijd worden de productie- en kwaliteitscontroleprocessen gevalideerd, wat resulteert in een hoge mate van consistentie tussen batches.
Producteigenschappen
| CAS | 9002-07-7 |
| EC | |
| Karakter | Witte of gebroken witte kristallijne kracht |
| Moleculair gewicht | 24 kDa |
| ISO-elektrisch punt | 8.26 |
| Zuiverheid (RP-HPLC) | β-trypsine≥70,0%;α-Trypsine≤20,0% |
| Specifieke activiteit | ≥3800,0 E/mg eiwit (BAEE) |
| Recombinante trypsine-activiteit | ≥2500,0U/mg vermogen (BAEE) |
| Identificatie | Paars |
| Optimale pH-waarde | 8,0 |
| Biobelasting | ≤300CFU/g |
| E. Coli-gastheerceleiwitresidu | ≤0,01% |
| E. ColiDNA-residu van de gastheercel | ≤10,0000ng/mg |
| Endotoxinegehalte (LAL-test) | ≤20,0EU/mg |
| Eiwitgehalte | 95,0%±10,0% |
Opslag condities
Stabiliteit van opslag: Recombinant trypsine gelyofiliseerd vermogen moet worden bewaard onder 2-8 ℃.Het is stabiel binnen 24 maanden.Nadat het is opgelost met 1 mM HCl of 50 mM HAC, moet het worden bewaard onder -25 ~ - 15 ℃.Er is geen activiteitsverlies na 10 keer herhaaldelijk invriezen en ontdooien.
Eenheidsdefinitie
25 ℃, pH 7,6, 3,2 ml reactieoplossing (1 cm lichtpad), één trypsine-eenheid (U) werd gedefinieerd als een toename van 0,003 in de absorptiewaarde bij 253 nm door enzymatische hydrolyse van BAEE per minuut.
Kwaliteitscontrole
Activiteit: Bepaling van de activiteit van trypsine door Farmacopee van de Volksrepubliek China Deel 4 (editie 2020).
.E. Coli gastheer cel eiwit residu: ELISA-kit.Farmacopee van de Volksrepubliek China Deel 4 (editie 2020) -E. Coli gastheerceleiwitresidu (3412).
.Eiwitzuiverheid: Farmacopee van de Volksrepubliek China Deel 4 (editie 2020) - Algemene regels voor HPLC-methode (0512).
. Biobelasting: Farmacopee van de Volksrepubliek China Deel 4 (editie 2020) - Algemene regels voor steriliteitstests (1101).•E coliDNA-residu van de gastheercele: Farmacopee van de Volksrepubliek China Deel 4 (editie 2020) DNA-residuen van gastheercellen (3407).. Endotoxine inhoud: Farmacopee van de Volksrepubliek China Deel 4 (editie 2020) - Algemene regels voor LAL-test (1143).
Productinstructie
1.Bereiding van de oplossing: Neem een geschikte hoeveelheid trypsine, afhankelijk van het eiwitgehalte (berekend aan de hand van de energieactiviteit en de eiwitactiviteit) van COA, en voeg HBSS-equilibratieoplossing toe (of een andere buffer die geschikt is voor celvertering. Voeg indien nodig EDTA toe tot een eindconcentratie van 0- 1 mM, het is het beste om de 2 mM niet te overschrijden).De aanbevolen trypsineconcentratie is ongeveer 0,1-0,3 mg/ml (concentratie aangepast aan de hand van verschillende cellen) en voorzichtig gemengd;deze stap kan bij kamertemperatuur worden uitgevoerd.
2. Gebruik een filter van 0,22 μm om de trypsine-oplossing te filteren en breng deze over naar een steriele container;Deze stap kan bij kamertemperatuur worden uitgevoerd.
3. De gefilterde trypsine-oplossing moet direct naar behoefte op de dag worden gebruikt (bijvoorbeeld door 1 ml toe te voegen aan T25-flessen, cellen te verteren bij 37 ° C), en de vloeistof kan gedurende 1-2 weken bij 2-8 ° C worden bewaard. .
4. Langdurige opslag: Als de bereide recombinante celdigestieoplossing lange tijd moet worden bewaard, kan deze gedurende 12 maanden stabiel worden bewaard bij -25~-15°C.
Productgebruik
Voor cel cultuur
• Weefselblokkadevertering, primaire celacquisitie.
• Passagedigestie van hechtende cellen.
• Celcultuur via microcarriermethode.
• Zacht verterende stamcellen.
• Immuunceltherapie, enz.
Voor recombinant eiwit:
.Recombinante insulineproductie.
.Eiwitsequencing, peptide-mapping.
.Specifieke proteolytische processen zoals proteomics-onderzoek.
Voorzorgsmaatregelen
.Hoge concentraties anorganische zouten hebben een duidelijk effect op de activiteit.
.Vermijd contact met andere eiwitproducten.
.Voor uw veiligheid en gezondheid dient u tijdens het gebruik een laboratoriumjas en handschoenen te dragen
