Peroxidase (bron van mierikswortel) Synoniem: waterstofperoxide-oxidoreductase;HRP

Mierikswortelperoxidase (HRP) wordt geïsoleerd uit de wortels van mierikswortel (Amoracia Rusticana) en behoort tot de ferroprotoporfyrinegroep van peroxidasen.HRP combineert gemakkelijk met waterstofperoxide (H2O2).Het resulterende [HRP-H2O2]-complex kan een grote verscheidenheid aan waterstofdonoren oxideren:
Donor + H2O2 → Geoxideerde donor + 2 H2O
HRP zal verschillende substraten oxideren (zie Tabel 1):
• Chromogene
• Chemiluminescerend (zoals luminol of isoluminol)
• Fluorogeen (zoals tyramine, homovanillinezuur of 4-hydroxyfenylazijnzuur)
HRP is een polypeptide met een enkele keten dat vier disulfidebruggen bevat.HRP is een glycoproteïne dat 18% koolhydraten bevat.De koolhydraatsamenstelling bestaat uit galactose, arabinose, xylose, fucose, mannose, mannosamine en galactosamine, afhankelijk van het specifieke isozym.

HRP is een veelgebruikt label voor immunoglobulinen in veel verschillende immunochemische toepassingen, waaronder immunoblotting, immunohistochemie en ELISA.HRP kan op verschillende manieren aan antilichamen worden geconjugeerd, waaronder glutaaraldehyde, perjodaatoxidatie, via disulfidebindingen, en ook via amino- en thiolgerichte verknopers.HRP is het meest gewenste label voor antilichamen, omdat het de kleinste en meest stabiele van de drie meest populaire enzymlabels is (peroxidase, β-galactosidase, alkalische fosfatase) en de glycosylering ervan leidt tot lagere niet-specifieke binding.Er is een overzicht gepubliceerd van conjugatiemethoden voor glutaaraldehyde en perjodaat.

Peroxidase wordt ook gebruikt voor de bepaling van glucose4 en peroxiden in oplossing.Verschillende publicaties, 6-24 proefschriften, 25-29 en proefschriften 30-46, hebben het gebruik van P8375 in hun onderzoeksprotocollen aangehaald.