Eén stap snelle RT-qPCR-sondepremix-UNG
Cat.nr.: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) is een op probes gebaseerde RT-qPCR snelle detectiekit die geschikt is voor single-plex of multiplex kwantitatieve PCR met RNA als sjabloon (zoals een RNA-virus).Dit product maakt gebruik van een nieuwe generatie antilichaam-gemodificeerde Taq DNA-polymerase en speciale reverse transcriptase in één stap, met een geoptimaliseerde buffer voor snelle amplificatie, die een snellere amplificatiesnelheid, hogere amplificatie-efficiëntie en specificiteit heeft.Het ondersteunt gebalanceerde amplificatie in zowel single-plex als multiplex van monsters met lage en hoge concentraties in korte tijd.
Componenten
1. 5×RT-qPCR-buffer (U+)
2. Enzymenmix (U+)
Opmerkingen:
A.5×RT-qPCR-buffer (U+) omvat dNTP en Mg2+;
B.Enzymmix (U+) omvat reverse transcriptase, Hot Start Taq DNA-polymerase, RNase-remmer en UDG;
C.Gebruik RNase-Free tips, EP-buizen, enz.
Meng vóór gebruik de 5×RT-qPCR-buffer (U+) grondig.Als er na het ontdooien neerslag optreedt, wacht dan tot de buffer weer op kamertemperatuur is gekomen, meng en los op, en gebruik ze vervolgens normaal.
Opslag condities
Het product wordt verzonden met droogijs en kan gedurende 1 jaar bij -25~-15℃ worden bewaard.
Instructies
1. Reactie Systeem
| Componenten | Volume (20 μl reactie) |
| 2 ×RT-qPCR-buffer | 4μl |
| Enzymmix (U+) | 0,8 μl |
| Primeur Vooruit | 0,1 ~ 1,0 μM |
| Primer omgekeerd | 0,1 ~ 1,0 μM |
| TaqMan-sonde | 0,05 ~ 0,25 μM |
| Sjabloon | X μL |
| RNase-vrij water | tot 25 μl |
Opmerkingen: Het reactievolume is 10-50 μl.
2. Fietsprotocol (Sstandaard)
| Fiets stap | Temp. | Tijd | Cycli |
| Omgekeerde transcriptie | 55 ℃ | 10 minuten | 1 |
| Initiële denaturatie | 95 ℃ | 30 sec | 1 |
| Denaturatie | 95 ℃ | 10 sec | 45 |
| Gloeien/verlenging | 60 ℃ | 30 sec |
| Fietsprotocol (Snel) Fiets stap |
Temp. |
Tijd |
Cycli |
| Omgekeerde transcriptie | 55 ℃ | 5 minuten | 1 |
| Initiële denaturatie | 95 ℃ | 5 sec | 1 |
| Denaturatie | 95 ℃ | 3 sec | 43 |
| Gloeien/verlenging | 60 ℃ | 10 sec |
Opmerkingen:
A.De temperatuur van de omgekeerde transcriptie ligt tussen 50 ℃ en 60 ℃, waardoor het verhogen van de temperatuur helpt bij het versterken van complexe structuren en sjablonen met een hoog CG-gehalte;
B.De optimale uitgloeitemperatuur moet worden aangepast op basis van de Tm-waarde van de primer, en de kortste tijd voor fluorescentiesignaalverzameling selecteren op basis van het Real Time PCR-instrument.
Opmerkingen
Draag de nodige PBM's, zoals laboratoriumjas en handschoenen, om uw gezondheid en veiligheid te garanderen!
