Bst 2.0 DNA-polymerase (glycerolvrij, hoge dichtheid)
Bst DNA-polymerase V2 is afgeleid van Bacillus stearothermophilus DNA-polymerase I, dat 5′ → 3 ′ DNA-polymerase-activiteit en sterke ketenvervangingsactiviteit heeft, maar geen 5 ′ → 3 ′ exonuclease-activiteit.Bst DNA Polymerase V2 is bij uitstek geschikt voor strengverplaatsing, isotherme amplificatie LAMP (Loop mediated isothermal amplification) en snelle sequencing.Dit Bst DNA-polymerase V2 is in staat de DNA-polymerase-activiteit bij kamertemperatuur te remmen, zodat het kan worden bediend en het reactiesysteem bij kamertemperatuur kan worden geformuleerd, waardoor niet-specifieke amplificatie wordt voorkomen en de efficiëntie van de reactie wordt verbeterd. gevriesdroogd worden.Bovendien is het in staat zijn activiteit vrij te geven bij verhoogde temperaturen, waardoor de noodzaak van een afzonderlijke activeringsstap wordt geëlimineerd.
Componenten
| Onderdeel | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA-polymerase V2 (glycerolvrij) (32U/μL) | 0,05 ml | 0,25 ml | 2,5 ml |
| 10×HC Bst V2-buffer | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 3×10 ml |
| MgSO4 (100mM) | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 2×10 ml |
Toepassingen
1.LAMP isothermische versterking
2.Enkele verplaatsingsreactie van de DNA-streng
3.Hoge GC-gensequencing
4.DNA-sequencing op nanogramniveau.
Opslag condities
Transport onder 0°C en opgeslagen bij -25°C~-15°C.
Eenheidsdefinitie
Eén eenheid wordt gedefinieerd als de hoeveelheid enzym die 25 nmol dNTP in 30 minuten bij 65°C in zuuronoplosbaar materiaal opneemt.
LAMP-reactie
| Componenten | 25 μlSysteem |
| 10×HC Bst V2-buffer | 2,5 μl |
| MgSO4 (100mM) | 1,5 μl |
| dNTP's (elk 10 mM) | 3,5 μl |
| SYTO™ 16 Groen (25×)a | 1,0 μl |
| Primermixb | 6 μl |
| Bst DNA-polymerase V2 (glycerolvrij) (32 U/uL) | 0,25 μl |
| Sjabloon | × μl |
| ddH₂O | Tot 25 μl |
Opmerkingen:
1) een.SYTOTM 16 Groen (25×): Afhankelijk van de experimentele behoeften kunnen andere kleurstoffen als vervanging worden gebruikt;
2) b.Primermengsel: verkregen door het mengen van 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB en andere volumes.
Reactie en toestand
1 × HC Bst V2-buffer, de incubatietemperatuur ligt tussen 60°C en 65°C.
Warmte-inactivatie
80°C, 20 minuten.
