2×PCR Master Mix (zonder kleurstof)
PCR Master Mix is een soort conventionele PCR-voorgemengde oplossing die klaar is voor gebruik, inclusief Taq DNA Polymerase, dNTP-mix MgCl2 en geoptimaliseerde buffer.Tijdens de reactie kunnen alleen de primer en het sjabloon worden toegevoegd voor amplificatie, wat de bedieningsstappen van het experiment aanzienlijk vereenvoudigt.Dit product bevat uitstekende stabilisatoren en is 3 maanden houdbaar bij 4℃.Het PCR-product heeft een 3'-dA-uitsteeksel en kan gemakkelijk in de T-vector worden gekloond.
Opslag condities
Het product moet twee jaar bij -25℃ ~ -15℃ worden bewaard.
Specificaties
Trouw (vs. Taq) | 1× |
Goede start | No |
Overhang | 3′-A |
Polymerase | Taq DNA-polymerase |
Reactie formaat | SuperMix of Mastermix |
Reactiesnelheid | Standaard |
product type | PCR Mastermix (2×) |
Instructies
1.Reactiesysteem
Componenten | Grootte (μL) |
Sjabloon-DNA | Geschikt |
Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
PCR-mastermix | 25 |
ddH2O | Tot 50 |
2.Versterkingsprotocol
Cyclus stappen | Temperatuur (°C) | Tijd | Cycli |
Pre-denaturatie | 94 ℃ | 5 mins | 1 |
Denaturatie | 94 ℃ | 30 sec | 35 |
Gloeien | 50-60 ℃ | 30 sec | |
Verlenging | 72 ℃ | 30-60 sec/kb | |
Laatste verlenging | 72 ℃ | 10 minuten | 1 |
Opmerkingen:
1) Sjabloongebruik: 50-200 ng genomisch DNA;0,1-10 ng plasmide-DNA.
2) mgr2+concentratie: Dit product bevat 3 mM MgCl2 geschikt voor de meeste PCR-reacties.
3) Gloeitemperatuur: Raadpleeg de theoretische Tm-waarde van primers.De gloeitemperatuur kan 2-5 ℃ lager worden ingesteld dan de theoretische waarde van de primer.
4) Verlengingstijd: Voor moleculaire identificatie wordt 30 sec/kb aanbevolen.Voor genklonering: 60sec/kb wordt aanbevolen.
Opmerkingen
1.Voor uw veiligheid en gezondheid dient u tijdens het gebruik laboratoriumjassen en wegwerphandschoenen te dragen.
2.Alleen voor onderzoeksgebruik!